液相色谱-液相色谱方法----通恒(商家)

---液相色谱的基本原理

色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationphase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。---液相色谱法以---的液相色谱为基础，---液相色谱，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有颗粒极细的---固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

液相色谱柱的结构：

（1）液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝（封头）与柱填料等组成。

柱管：多用不锈钢制成，若果使用时柱压不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有---的光洁度。用于柱填料的装填。空柱各组件均为不锈钢材质，---受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。压帽：即色谱柱两端套合于柱管端外壁的塑性圆柱帽，中部有小孔，多为聚四氟乙烯制成，用于固定筛板。

密封环：位于接头螺旋环内壁的弹性环，多为聚四氟乙烯制成，---液相色谱便宜，用于色谱柱两端压帽与柱外壁的密封。

（2）柱填料：

液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。

正相柱：

多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3-10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合-cn，---液相色谱效果好，-nh2等---团即所谓的键合相硅胶。

反相柱：

主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基---团(ods)的非极性填料。也有无定型和球型之分。

常用的其他的反相填料还有键合c8、c4、c2、---等，其颗粒粒径在3-10μm之间。