反相色谱分离纯化后，怎样除去流动相产品中的tfa和---或其他杂质？

tfa是反相色谱分离中常用的添加剂。可以用冻干的办法去除，国外许多文献是这样---的。还可以试试离子交换、凝胶层析、甚至透析和超滤，其中，离子交换层析效果比较好，还可以起到浓缩样品的作用。

首先，冻干的办法应该可以几乎完全地除去tfa和---，---实验前尽量先检测一下冻干品中的残留量，只要不超过允许范围，这种办法是很简单、有效的。

其次，如果你的---的分装量不大的话(<100ug)，建议你用离子交换层析，尽量装一个小一点儿的柱子，让含盐洗脱峰的蛋白浓度达10mg/ml以上，稀释后完全符合试验要求。如果用分子筛，考虑稀释，尽量也先过一个离子交换。此外可以试试疏水层析。如果产品是碱的话，可能会形成tfa盐，这样通过上述方法就无法除去。一般可以用碱水洗，然后将产品萃取出来。或者在里面加入一定量的---，再干燥后形成---盐。

工业制备色谱

现代生物技术的迅速发展及其产业化对其下游过程，即生物技术产品(尤其是各种蛋白质)的分离纯化技术提出了迫切的需求。通过发酵和动、植物细胞培养等生成的目标产物需通过一系列的分离和纯化等步骤才能获得终的产品。通常，生物技术产品生产中分离提纯成本要占其生产总成本的40%~90%。在以小分子产品为主的传统发酵工业中分离成本要占总成本的60%左右，而以蛋白质为代表的现代基因工程产品则有时可---90%左右。作为生物工程的一个组成部分，分离技术在其产品实现中起到重要作用。

气相色谱

在气相色谱中，以气体作流动相，以固定液或固体吸附剂作固定相。根据混合物与流动相、固定相之间的相对亲和力，分离混合物的挥发性成分。由于固定相的数量有限以及仪器和操作程序相对昂贵，这种技术没有得到广泛的应用。但气相色谱对热稳定、易挥发、能气化的物质具有较好的检测效果。

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氧化铝基质的基本特点

氧化铝基质的一大特点是结构稳定，既可呈酸性，又可呈碱性。其次，铝元素在自然界含量丰富，仅次于氧元素和硅元素。在实际应用中，色谱用氧化铝填料主要应用于正相色谱、反相色谱和离子交换色谱。对于一些不饱和化合物，---是芳香族化合物的保留效果较佳，有时还可用于分离芳烃类异构体。除此之外，氧化铝基质的ph耐受范围在3-12，可用于分离碱性化合物。以上这些特点使得氧化铝在某些领域能与硅胶形成---的互补作用。