发布单位：北京创新通恒科技有限公司 发布时间：2022-6-27
问：tfa在缓冲液中是不是只起到调节ph的作用呢？tfa的浓度越高基线的漂移越厉害，那是不是说它的浓度在缓冲液ph允许的情况下越低越好呢？
答：（1）tfa起到类似离子对的作用，一般浓度在0.05-0.1%，过高的浓度，会使溶液偏酸，长时间使用可能影响柱子寿命。
（2）同时tfa可以抑制硅胶表面硅醇基，---碱性化合物的峰型。有时0.1%tfa分离不好的话。可以考虑加大浓度到0.2%。但要注意用完后及时冲洗色谱柱。
（3）走梯度时，因为走成基线漂移，但对制备的影响不大。
低压：一般而言，低压适合易分离化合物，但分离时间长很容易造成敏感化合物分解。中压：中压一般采用恒流泵提供恒定的流动相流速，填料颗粒更小，分辨率更高，耐受更高压力和更快流速。高压：高压通常在分离制备的后阶段采用，应用于分离困难的样品，纯度甚至能达到99.9%。
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流速变化：可能是因存在气泡、泄漏或泵问题（故障）导致流速与设定值发生变化，导致保留时间变化。
气泡问题：可能伴有柱压过低或柱压波动，且保留时间延长。对于双头泵，如果只有一个泵头存在气泡，则流量和压力可能会发生脉动。
泄漏也会延长保留时间。查看接头如有液滴或结晶析出，可证明有泄露。请---注意色谱柱之前的接头。如果使用不锈钢配件，通常将接头螺母手动拧紧，再扳手拧紧1/4圈，便可以阻止泄漏。使用peek接头时，应停止泵，松开接头，将管路推到接口端口的底部，再拧紧接头。拧紧peek接头时如果存在流动的液体，会导致管道在配件中滑动，产生柱外死体积，进而影响分离效果。
分离度降低原因和解决方法
1、流动相污染或变质（引起保留时间变化）
重新配置流动相
2、保护柱或分析柱阻塞
去掉保护柱进行分析。如果---则更换保护柱。如果分析柱阻塞，可进行反冲。如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏，建议使用恰当的再生程序。如果问题仍然存在，进口可能阻塞了，更换入口处的筛板或更换色谱柱。
